Optimización de la expresión de un amplicón viral basado en PVX en plantas de tabaco (Record no. 215027)

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Transcribing agency FlNmELB
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Universal Decimal Classification number 57
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Classification number 574
Edition number 22
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Personal name Bey, Paula.
245 10 - TITLE STATEMENT
Title Optimización de la expresión de un amplicón viral basado en PVX en plantas de tabaco
260 ## - PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC. (IMPRINT)
Place of publication, distribution, etc Buenos Aires, Argentina
Name of publisher, distributor, etc Universidad de Buenos Aires
Date of publication, distribution, etc 2010.
300 ## - PHYSICAL DESCRIPTION
Extent 141 p.
502 ## - DISSERTATION NOTE
Dissertation note Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Ciencias Biológicas.
520 ## - SUMMARY, ETC.
Summary, etc Con el objetivo de optimizar la producción de proteínas heterólogas en plantas se desarrolló un sistema de expresión basado en un amplicón derivado del genoma del PVX. Se diseñaron distintos amplicones virales que permiten la expresión, tanto constitutiva como inducible, de proteínas recombinantes. La utilización del amplicón constitutivo permitió obtener, por primera vez, plantas transgénicas que sobrexpresan altos niveles de proteínas virales. Además, se logró expresar exitosamente GFP a partir de un amplicón inducible, tanto en ensayos de expresión transitoria como en plantas transgénicas. Uno de los problemas que dificultan la producción de proteínas de interés en plantas utilizando vectores virales es el establecimiento de respuestas de silenciamiento génico postraduccional (PTGS) en respuesta a la replicación viral. Para intentar superar esta dificultad, se propuso co-expresar un amplicón viral junto con una proteína supresora del PTGS. Se caracterizó la actividad de una nueva proteína supresora del PTGS, la proteína 15K codificada en el genoma del Garlic mite-borne filamentous virus (GmbFV). Si bien esta proteína muestra una actividad supresora débil en plantas silenciadas por agroinfiltración con transgenes u horquillas de silenciamiento, presenta la ventaja de no producir fenotipos aberrantes en plantas transgénicas. Mediante la co-agroinfiltración con construcciones que expresan la proteína 15K y el amplicón PVX-2aA (amplicón que expresa el epítope 2aA del virus de aftosa) se lograron obtener altos niveles de una fusión del epítope de interés a la cápside viral en plantas de Nicotiana benthamiana en un corto período de tiempo. Este resultado sugiere que es posible generar sistemas estables que permitan obtener altos niveles de expresión mediante el cruzamiento entre plantas transgénicas que expresen la proteína supresora 15K y amplicones de interés.
533 ## - REPRODUCTION NOTE
Type of reproduction Recurso electrónico. Santa Fe, Arg.: e-libro, 2015. Disponible vía World Wide Web. El acceso puede estar limitado para las bibliotecas afiliadas a e-libro.
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Personal name Mentaberry, Alejandro N,
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Link text Disponible en e-libro
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